La microdissection laser (Laser Capture Microdissection, LCM) est une technique de pointe qui permet d’isoler, avec une grande précision, des cellules ou des régions tissulaires spécifiques à partir d’une coupe histologique. Elle constitue un outil incontournable en recherche biomédicale, notamment pour les études de génomique, transcriptomique et protéomique, car elle garantit une analyse ciblée de populations cellulaires homogènes au sein d’échantillons complexes.
Principe de la Microdissection Laser
Le principe repose sur l’utilisation d’un laser focalisé qui agit comme un scalpel optique. La technique permet de :
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Visualiser l’échantillon à l’aide d’un microscope.
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Délimiter une zone d’intérêt (cellules tumorales, neurones, tissus infectés, etc.).
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Découper cette zone avec le laser sans endommager les structures voisines.
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Collecter les cellules isolées grâce à des systèmes d’adhésion ou de gravité, pour des analyses ultérieures.
Il existe deux grandes approches :
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Microdissection par capture laser (LCM classique) : le laser chauffe un film adhésif qui colle aux cellules d’intérêt.
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Microdissection par pression ou catapultage laser (Laser Pressure Catapulting, LPC) : les cellules découpées sont projetées vers un tube de collecte grâce à l’énergie du laser.
Étapes de la Microdissection Laser
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Préparation de l’échantillon : fixation, inclusion en paraffine ou congélation, puis coupe fine au microtome.
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Coloration (facultative) : souvent avec l’Hématoxyline-Éosine (H&E) pour visualiser la morphologie tissulaire.
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Identification de la zone d’intérêt sous le microscope.
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Dissection au laser : découpe précise des cellules ou régions choisies.
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Collecte des échantillons dans un tube adapté pour analyses moléculaires.
Applications de la Microdissection Laser
1. Recherche en Cancérologie
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Analyse des cellules tumorales spécifiques au sein d’un tissu hétérogène.
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Études de mutations somatiques, expression génique et profils protéiques.
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Compréhension des mécanismes d’hétérogénéité tumorale.
2. Neurosciences
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Isolement de neurones ou régions cérébrales précises.
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Études des maladies neurodégénératives (Alzheimer, Parkinson).
3. Infectiologie et Immunologie
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Séparation de tissus infectés pour analyser les interactions hôte-pathogène.
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Études de l’infiltration lymphocytaire dans les tissus tumoraux ou inflammatoires.
4. Transcriptomique et Protéomique
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Extraction d’ARN ou de protéines à partir de cellules spécifiques.
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Analyses fines de l’expression génique différentielle.
5. Pathologie et Diagnostic
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Identification de biomarqueurs spécifiques.
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Complément aux techniques d’immunohistochimie et de séquençage.
Avantages et Limites
Avantages :
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Haute précision spatiale.
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Préservation de l’intégrité des biomolécules (ADN, ARN, protéines).
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Possibilité de travailler sur des tissus archivés (paraffine).
Limites :
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Préparation des échantillons parfois complexe.
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Quantité limitée de matériel biologique isolé.
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Coût élevé de l’équipement.
Conclusion
La microdissection laser s’impose comme une technique clé en biologie moderne. En permettant d’isoler des cellules spécifiques dans un environnement complexe, elle ouvre la voie à des analyses moléculaires ciblées et précises. Ses applications, allant de la cancérologie aux neurosciences, en font un outil indispensable pour mieux comprendre la biologie cellulaire et développer de nouvelles stratégies diagnostiques et thérapeutiques.